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    鳥氨酸脫羧酶肉湯生化管使用方法

    李令梅
    錄入時間:2023-4-11 13:39:27 來源:青島海博生物

    一、培養基用途:

      用于細菌鳥氨酸脫羧酶試驗。


    二、原理:

      某些細菌可產生賴氨酸脫羧酶,使鳥氨酸脫去羧基,生成腐胺,從而使培養基變堿性并通過指示劑變色來觀察。脫羧酶是適應酶或稱誘導酶,對底物有特異性,在無相對氨基酸的培養基中不產生此酶,并且需要酸性環境和適宜溫度。故在培養基中加入葡萄糖,使細菌發酵葡萄糖產酸,以利于脫羧酶的產生。氨基酸的分解是在厭氧條件下進行,故在培養基表面加液體石蠟。由于細菌發酵葡萄糖產酸,在培養初期培養基和對照培養基呈黃色,繼續培養時,若氨基酸經脫羧或水解產生胺類則培養基變堿,呈紫色或紫紅色,即為陽性反應;如至培養末期培養基如同對照管一樣均呈黃色,則判為陰性反應。


    三、培養基成分

    成分

    含量(g/L)

    蛋白胨

    5.0

    鳥氨酸

    5.0

    葡萄糖

    1.0

    酵母浸粉

    3.0

    溴甲酚紫

    0.016

    pH 6.8±0.1 25℃


    四、操作方法

      1、用磨砂輪在安瓿瓶頸部劃線一圈,掰開待用;傾注平皿備用。

      2、將標準儲備菌株接種到非選擇性肉湯中或采用其他制備方法,制備成5 McFarland濁度(約109CFU/ml)的菌懸液;

      3、吸取0.05ml-0.08ml(約1-2滴)菌懸液至鳥氨酸脫羧酶生化管和氨基酸脫羧酶試驗對照生化管,36±1℃培養24±2h后,觀察試驗結果。


    五、實驗結果

    質控菌株

    菌株編號

    生長情況

    其他特征

    福氏志賀氏菌

    ATCC12022

    +++

    陰性,黃色

    宋內志賀氏菌

    CMCC(B)51592

    +++

    陽性,紫色

    痢疾志賀氏菌

    CMCC(B)51252

    +++

    陰性,黃色

    大腸埃希氏O157菌

    ATCC35150

    +++

    陽性,紫色

    坂崎腸桿菌

    ATCC29004

    +++

    陽性,紫色

    鼠傷寒沙門氏菌

    ATCC14028

    +++

    陽性,紫色

    普通變形桿菌

    CMCC(B)49027

    +++

    陰性,黃色


    鳥氨酸脫羧酶肉湯GS012中


    相關產品:

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    注:本文屬海博生物原創,未經允許不得轉載。

     

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