農藥殘留——敵敵畏和敵百蟲檢測方法

1．分析目標化合物

    敵敵畏  、敵百蟲                                                                         

2．儀器設備

    帶堿熱離子檢測器、火焰光度檢測器（磷干涉片，波長526nm）或高靈敏度氮磷檢測器氣相色譜儀和氣相色譜—質譜儀

3．試劑

  丙酮

  乙酸乙酯

  10％氯化鈉溶液
  無水硫酸鈉

  正己烷

  乙腈

4．標準品

    敵敵畏：含敵敵畏97％以上，沸點為128℃～129℃(減壓：2.5kPa)。
    敵百蟲：含敵百蟲99％以上，熔點為83℃～84℃。

5．試驗溶液的制備

a 提取方法
    ①谷類、豆類、種籽類
    將樣品粉碎，通過420μm的標準網篩后，稱取其10.0g，加水20mL，放置2小時。
    加入100mL丙酮，攪拌3分鐘后，用涂布1cm厚硅藻土的濾紙，抽濾于磨口減壓濃縮器中。取出濾紙上的殘留物，加入50mL丙酮，攪拌3分鐘后，按上述同樣操作，合并濾液于減壓濃縮器中，40℃以下濃縮至約30mL。
    將其移入預先注入100mL 10％氯化鈉溶液的300 mL分液漏斗中。用100mL乙酸乙酯洗滌上述減壓濃縮器的茄型瓶，并入洗液于上述分液漏斗中。用振蕩器激烈振蕩5分鐘后，靜置，乙酸乙酯層移入300mL三角瓶中。水層中加入50mL乙酸乙酯，按上述同樣操作。合并乙酸乙酯層于上述300mL三角瓶中。加入適量無水硫酸鈉，不時振蕩、混合，放置15分鐘后，濾入磨口減壓濃縮器中。再用20mL乙酸乙酯洗滌上述三角瓶，以此洗滌液洗滌濾紙上的殘留物，重復操作二次。合并兩洗滌液于上述減壓濃縮器中，40℃以下除去乙酸乙酯。
    殘留液中加入30mL正己烷，移入100mL分液漏斗中。加入30mL正己烷飽和乙腈，用振蕩器激烈振蕩5分鐘后，靜置，乙腈層移入磨口減壓濃縮器中。正己烷層中再加入30 mL正己烷飽和乙腈，按上述同樣操作，重復操作兩次。合并乙腈層于減壓濃縮器中，40℃以下濃縮至約1mL，在室溫下用氮氣進一步吹干。殘留物中加入5mL丙酮：正己烷(1：1)混合溶液溶解。
    ②水果、蔬菜、末茶和啤酒花
    水果和蔬菜：準確稱取約1kg樣品，必要時定量加入適量水，攪碎混合均勻后，稱取相當于20.0g的量。
    啤酒花：樣品粉碎后，稱取其5.00g，加入水20mL，放置2小時。
    末茶：稱取5.00g樣品，加入水20mL，放置2小時。
    加入100mL丙酮，攪拌3分鐘后，用涂不1cm厚硅藻土的濾紙，抽濾于磨口減壓濃縮器中。取出濾紙上的殘留物，加入50mL丙酮，攪拌3分鐘后，按上述同樣操作，合并濾液于減壓濃縮器中，40℃以下濃縮至約30mL。
    將其移入預先注入100mL 10％氯化鈉溶液的300mL分液漏斗中。用100mL乙酸乙酯洗滌上述減壓濃縮器的茄型瓶，合并洗液于上述分液漏斗中，用振蕩器激烈振蕩5分鐘后，靜置，乙酸乙酯層移入300mL三角瓶中。水層中加入50mL乙酸乙酯，按上述同樣操作。合并乙酸乙酯層于上述300mL三角瓶中。加入適量無水硫酸鈉，不時振蕩、混合，放置15分鐘后，濾入磨口減壓濃縮器中。再用20mL乙酸乙酯洗滌上述三角瓶，以此洗滌液洗滌濾紙上的殘留物，重復操作二次。合并二洗滌液于上述減壓濃縮器中，40℃以濃縮至約1mL，在室溫下用氮氣進一步吹干。殘留物中加入5mL丙酮：正己烷(1：1)混合溶液溶解。
    ③ 末茶以外的茶
    將9.00 g樣品浸泡于540mL 100℃水中，在室溫下放置5分鐘后,過濾，移取360mL冷卻后的濾液于500mL三角瓶中。加入2mL飽和乙酸鉛溶液，室溫下放置1小時后，用涂布1cm厚硅藻土的濾紙抽濾于1000mL分液漏斗中，再用50mL丙酮洗滌濾紙上的殘留物，并入洗液于上述分液漏斗中，加入100g氯化鈉及100mL乙醚，用振蕩器激烈振蕩5分鐘后，靜置，乙醚層移入300mL三角瓶中。水層中加入100mL乙醚，按上述同樣操作，合并乙醚層于上述三角瓶中。加入適量無水硫酸鈉，不時振蕩、混合，放置15分鐘后，濾入磨口減壓濃縮器中，再用20mL乙醚洗滌上述三角瓶，以此洗滌液洗滌濾紙上的殘留物，重復操作二次，合并兩洗滌液于上述減壓濃縮器中，40℃以下濃縮至約1mL，在室溫下用氮氣進一步吹干。殘留物中加入5mL丙酮：正己烷(1：1)混合溶液溶解。

b 凈化方法
    ①菠菜和茶以外的農作物
    在內徑15mm、長300mm色譜柱中裝入5g懸浮在正已烷中的柱色譜用硅膠(粒徑63～200μm)，其上面再加入約5g無水硫酸鈉，放出正己烷：丙酮（1：1）混合溶液至柱上端留有少量的正己烷：丙酮（1：1）混合溶液。柱中注入a 提取方法所的的溶液后，注入150mL丙酮：正己烷(1：1)混合溶液，收集流出液于磨口減壓濃縮器中，40℃以下濃縮至約1mL，在室溫下用氮氣進一步吹干。殘留物中加入丙酮溶解，準確至2mL（水果、蔬菜為4mL）。
    ② 菠菜和茶
    在內徑15mm、長300mm色譜柱中裝入5g懸浮在正已烷中的柱色譜用硅膠(粒徑63～200μm)，其上面再加入約5g無水硫酸鈉，放出正己烷：丙酮（1：1）混合溶液至柱上端留有少量的正己烷：丙酮（1：1）混合溶液。柱中注入a 提取方法所的的溶液后，注入150mL丙酮：正己烷(1：1)混合溶液，收集流出液于磨口減壓濃縮器中，40℃以下濃縮至約1mL，在室溫下用氮氣進一步吹干。殘留物中加入丙酮溶解，準確至4mL（末茶為8mL）。在活性炭小柱(500mg) 中注入10mL丙酮，流出液舍去。柱中注入1mL上述溶液后，注入10mL丙酮，收集流出液于磨口減壓濃縮器中，40℃以下濃縮至約1mL。

c 衍生化
    移取1mL b 凈化方法所得的溶液（波菜和茶時取全量），放入10mL的具螺旋塞試管中，在室溫下用氮氣除去丙酮。注入100μL N－甲基雙三氟乙酰胺和900μL丙酮：吡啶(1000：1)混合溶液。塞緊后在不時振蕩混合下60℃加熱2小時，放置至室溫。此為試驗試樣。

6．操作方法

a 定性試驗
    按下列的操作條件進行試驗，試驗結果應與用標準品按5．試驗溶液的制備中c 衍生化相同操作所獲得的結果一致。
    操作條件
    柱：內徑0.53mm，長10～30m 石英毛細管，涂布1.0μm厚氣相色譜法用14％氰丙基苯基－甲基硅酮，老化。
    柱溫：50℃保持1分鐘，此后以每分鐘升溫20℃。到240℃后，保持10分鐘。
    進樣器溫度：240℃
    檢測器溫度：245℃
    氣體流量：以氦氣作載氣。調節流速使敵敵畏約3分鐘流出。同時調節空氣和氫氣流量至適當條件。
b 定量試驗
    根據與a 定性試驗相同操作條件獲得的試驗結果，峰高法或峰面積法定量。
c 確證試驗
    按照與a 定性試驗相同的操作條件，用氣相色譜—質譜儀測定，試驗結果必須與用標準品按5．試驗溶液的制備c 衍生化相同操作所獲得的結果一致。必要時，用峰高法或峰面積法進行定量。

7．定量限

    敵敵畏    0.01 mg/kg
    敵百蟲    0.01 mg/kg

8．注意事項

    敵敵畏不因衍生化操作而變化。敵百蟲衍生物易分解而污染氣相色譜儀的進樣器和柱子。敵百蟲的衍生物加熱時間如超過3小時，回收率差。使用堿熱離子檢測器、高靈敏氮磷檢測器作為檢測器時，柱子最好為經老化的5 %苯基--甲基硅酮柱。