啶斑肟檢測方法

1．分析目標化合物

    啶斑肟（E 體）、啶斑肟（Z 體）

2．儀器設備

    帶電子捕獲檢測器的氣相色譜儀和氣相色譜—質譜儀。

3．試劑
   鹽酸羥胺

   乙酸鉛溶液

   甲醇

   氯化鈉

   二氯甲烷

   乙腈

   氫氧化鈉

   無水硫酸鈉

   乙酸乙酯

   正己烷

   丙酮

   飽和乙酸鉛   

4．標準品

    啶斑肟（E體）：含啶斑肟（E 體）99％以上，沸點為139℃～140℃（減壓0.0040kPa）。
    啶斑肟（Z體）：含啶斑肟（Z體）99％以上，熔點為63.5℃～64.0℃。

5．試驗溶液的制備

a 提取方法
① 豆類、水果、蔬菜和末茶
    豆類：將樣品粉碎，通過420μm的標準網篩后，稱取其20.0g。
    水果和蔬菜：準確稱取約1kg樣品，必要時定量加入適量水，加入50g鹽酸羥胺，攪碎混合均勻后，稱取相當于20.0g樣品的量。
    末茶：稱取20.0g樣品g。
    加入10mL 5%乙酸鉛溶液和100mL甲醇，用振蕩器激烈振蕩攪拌30分鐘后，靜置，用涂布1cm厚硅藻土的濾紙抽濾于磨口減壓濃縮器中。取出濾紙上的殘留物，加入50mL甲醇，用振蕩器激烈振蕩攪拌30分鐘后，靜置，按上述同樣操作，合并濾液于減壓濃縮器中，40℃以下濃縮至約50mL。
    將其移入預先注入100mL5%氯化鈉溶液和50mL二氯甲烷的500mL分液漏斗中。加50mL乙腈和10mL 1mol／L氫氧化鈉溶液，用振蕩器激烈振蕩5分鐘后，靜置，二氯甲烷層移入300mL三角瓶中。水層中加入50mL二氯甲烷，按上述同樣操作，合并二氯甲烷層于上述三角瓶中。加入適量無水硫酸鈉，不時振蕩、混合，放置15分鐘后，濾入磨口減壓濃縮器中。再用20mL二氯甲烷洗滌三角瓶，以此洗液洗滌濾紙上的殘留物，合并洗液于減壓濃縮器中，40℃以下除去二氯甲烷。殘留物中加入10mL乙酸乙酯：正己烷（3：17）混合溶液溶解。
② 末茶以外的茶
    將9.00g樣品浸泡在540mL 100℃的水中,在室溫放置5分鐘后, 移取360mL冷卻后的濾液于500mL三角瓶中。加入100mL丙酮和2mL飽和乙酸鉛，搖動混合10秒后，用涂布1cm厚硅藻土的濾紙抽濾，濾液移入1000mL三角瓶中。再用50mL丙酮：水（1：1）混合溶液洗滌500mL三角瓶，以此洗滌液洗滌紙上的殘留物，合并洗液于1000mL三角瓶中。
    將其移入預先注入100mL5%氯化鈉溶液和50mL二氯甲烷的1000mL分液漏斗中，加入50mL乙腈和10mL 1mol／L氫氧化鈉溶液，用振蕩器激烈振蕩5分鐘后，靜置，二氯甲烷層移入300mL三角瓶中。水層中加入50mL二氯甲烷，按上述同樣操作，合并二氯甲烷層于上述三角瓶中。加入適量無水硫酸鈉，不時振蕩、混合，放置15分鐘后，濾入磨口減壓濃縮器中。再用20mL二氯甲烷洗滌三角瓶，以此洗液洗滌濾紙上的殘留物，合并洗液于減壓濃縮器中，40℃以下除去二氯甲烷。殘留物中加入10mL乙酸乙酯：正己烷（3：17）混合溶液溶解。
b 凈化方法
    在內徑15mm、長300mm色譜管中注入5g懸浮在正已烷中的柱色譜用合成硅酸鎂，其上面再裝入約5g無水硫酸鈉，放出正已烷至柱上端留有少量正已烷。柱中注入a 提取方法所得的溶液后，注入50mL乙酸乙酯：正己烷（3：17）混合溶液，棄去流出液。再注入100mL乙酸乙酯：正己烷（3：7）混合溶液，收集流出液于磨口減壓濃縮器中，40℃以下除去乙酸乙酯和正己烷。殘留物中加入乙酸乙酯溶解，準確至10mL，此為試驗溶液。

6．操作方法

a 定性試驗
    按下列操作條件進行試驗。試驗結果應與標準品的一致。
    操作條件
    柱：內徑0.53mm、長15m石英毛細管，涂布1.5μm厚氣相色譜用5%苯基--甲基硅酮，老化。
    柱溫：在180℃保持2分鐘，此后每分鐘升溫5℃。到達240℃后保持5分鐘。
    進樣器溫度：280℃
    檢測器溫度：290℃
    進樣方式：不分流。
    氣體流量：以氦氣作載氣，調節流量使啶斑肟（E 體）約11分鐘流出。
b 定量試驗
    根據與a 定性試驗相同試驗條件所得的試驗結果，用峰高法或峰面積法分別對啶斑肟（E體）和啶斑肟（Z體）進行定量。以啶斑肟（E體）和啶斑肟（Z體）的和求得啶斑肟的含量。 

7．定量限

    0.01 mg/kg

8．注意事項

    對啶斑肟（E體）和啶斑肟（Z體）分別進行定量，它們的和為啶斑肟的分析值。